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新型蓝白斑筛选系统及其在 T T 载体构建中 的应用实例

2018/9/29 14:59:17

技术成熟度:中试技术

转让方式:技术入股

预计投资资金(万元):1000万以上

成果简述:成果简介:
本发明涉及一种新型的蓝白斑筛选系统,该筛选系统主要包括两部分:可
组成型表达非核糖体肽合成酶编码基因的大肠杆菌菌株和含有磷酸泛酰巯基乙
胺转移酶编码基因的质粒。本发明的筛选系统利用內源合成的色素作为蓝白筛
选指示,因此无需添加外源底物和诱导剂,也无需特殊的检测设备,能够快速、
简便、经济、高效地完成筛选过程。本筛选系统可以完全代替β-半乳糖苷酶
( lacZ )为基础的筛选系统 – 用于基因片段克隆的筛选。我们以该筛选系统
为基础构建了快速制备 T 载体的重组质粒。该质粒经过一步限制性内切酶消化
可以大量制备 T 载体。获得的 T 载体用于 PCR 产物克隆时,在培养基中无需添
加任何显色诱导物或底物,菌落呈现的蓝白两色的颜色区分能够直接锁定目标
克隆。

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